原代MSC臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基基本成分與特性:
基礎(chǔ)培養(yǎng)基:通常采用MEM-α基礎(chǔ)培養(yǎng)基,這是一種廣泛用于多種懸浮和貼壁哺乳動物細(xì)胞培養(yǎng)的基礎(chǔ)培養(yǎng)基。MEM-α是最小必需培養(yǎng)基(MEM)的修改版,包含非必需氨基酸。它不含核苷,可作為DG44和其他DHFR陰性細(xì)胞的選擇培養(yǎng)基。此外,MEM-α不包含蛋白質(zhì)、脂質(zhì)或生長因子,因此需要補(bǔ)充額外的營養(yǎng)成分,如胎牛血清(FBS)或其他血清替代物。
緩沖系統(tǒng):MEM-α使用碳緩沖液系統(tǒng)(2.2g/L),因此需要5%~10%的CO2環(huán)境來保持生理pH值。為了維持pH值的穩(wěn)定,還可以添加碳酸氫鈉(NaHCO3)或其他緩沖化合物。
其他成分:除了基礎(chǔ)培養(yǎng)基和緩沖系統(tǒng)外,原代MSC臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基還可能包含谷氨酰胺、生長因子、細(xì)胞因子、非必需氨基酸(NEAA)等營養(yǎng)成分,以刺激細(xì)胞增殖和延長培養(yǎng)細(xì)胞的活力。
使用注意事項:
無菌操作:在使用原代MSC臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基時,應(yīng)嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作規(guī)程,避免細(xì)菌、真菌等微生物的污染。
pH值監(jiān)測:定期監(jiān)測培養(yǎng)基的pH值,確保其維持在適宜的范圍內(nèi)(通常為7.2~7.6)。如果pH值偏離正常范圍,應(yīng)及時進(jìn)行培養(yǎng)基交換或調(diào)節(jié)培養(yǎng)箱氣體等措施。
營養(yǎng)成分補(bǔ)充:根據(jù)細(xì)胞生長情況和實(shí)驗需求,適時補(bǔ)充營養(yǎng)成分,如生長因子、細(xì)胞因子等。
存儲條件:原代MSC臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基應(yīng)存放在陰涼、干燥、避光的地方,避免高溫和潮濕環(huán)境對其造成不良影響。